2026-03-10T09:38:44Z https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/oai

oai:kanazawa-u.repo.nii.ac.jp:00054941 2024-07-01T06:26:40Z 2812:2813:2831

アポトーシス促進因子Bidの制御機構 木下, 健 1818 20311681 昨年度単離したBid結合因子(clone-2)の機能解析を進めた。1,clone-2遺伝子の発現分布をNorthern Blotで解析した。正常組織(CLONTECH社のMultiple Tissue Northern Blotを利用した)ではBrain、Liverで強いmRNAの発現を検出した。培養細胞(Cos7,Hela, HEK293,HepG2,Jurkat K562,THP1)ではHepG2細胞でやや強く、Cos7,HEK293で弱いmRNA発現を検出した。RT-PCR解析では全てのcell lineで発現が確認された。2,clone-2の安定発現細胞株の樹立を試みた。Jurkat細胞にのcDNAを組み込んだpIRES2-EGFP(CLONTECH社)ベクターを導入し、G418耐性、GFP発現を指標にclone-2の安定発現クローンを4種類得た。4クローン中2クローンがレコンビナントFasリガンドで誘導されるアポトーシスに耐性を示した。3,clone-2の細胞内局在を調べた。clone-2に対するポリクローナル抗体を作製し、HepG2細胞を免疫染色したところ、ミトコンドリアに強い染色像が見られた。HepG2細胞を分画し、western blot解析したところ、ミトコンドリアを含むheavy membrane画分にclone-2のカルボキシ末端側とみられる14kDaのバンドを検出した。clone-2の全長に相当する蛋白のバンドは確認できなかった。4,アンチセンスRNA発現ベクター導入による内在性clone-2の発現阻害を試みたが、14kDaのバンドの消失は認められなかった。 以上の結果より、過剰発現系においてはclone-2がBidで誘導されるアポトーシスに対して抑制的に働く可能性が示唆された。 研究課題/領域番号:13770106, 研究期間(年度):2001-2002 出典：「アポトーシス促進因子Bidの制御機構」研究成果報告書　課題番号13770106 （KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （ https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-13770106/ ）を加工して作成 金沢大学がん進展制御研究所 research report 2016-04-21 AM application/pdf 平成14(2002)年度 科学研究費補助金 若手研究(B) 研究概要 2001 – 2002 1p. 2002 Research Rroject Summary https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/record/54941/files/CA-PR-KINOSHITA-T-kaken 2016-1p.pdf https://doi.org/10.24517/00061217 http://hdl.handle.net/2297/00061217 https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/records/54941 jpn https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=20311681 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=20311681 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-13770106/ https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-13770106/