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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成07(1995)年度

ヒトにおける紫外線損傷修復機構のタンパクレベルの研究

https://doi.org/10.24517/00057266
https://doi.org/10.24517/00057266
fa6c195f-705b-4dab-b57d-ab0fe40c9a5f
名前 / ファイル ライセンス アクション
PH-PR-NIKAIDO-O-kaken PH-PR-NIKAIDO-O-kaken 1997-3p.pdf (141.8 kB)
license.icon
アイテムタイプ 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2022-05-23
タイトル
タイトル ヒトにおける紫外線損傷修復機構のタンパクレベルの研究
タイトル
タイトル Isolation and characterization of a protein participating in nucleotide excision repair in human cells
言語 en
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00057266
ID登録タイプ JaLC
著者 二階堂, 修

× 二階堂, 修

WEKO 92309
e-Rad 60019669

二階堂, 修

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提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 金沢大学薬学部
書誌情報 平成7(1995)年度 科学研究費補助金 一般研究(B) 研究成果報告書概要
en : 1995 Fiscal Year Final Research Report Summary

巻 1994-1995, p. 3p., 発行日 1997-03-03
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 UV-damage-specific binding proteins are considered to play important roles in the early steps of DNA repair in human cells irradiated with UV.We have survayd the nuclear and cytoplasmic proteins binding selectively to UV-irradiated DNA.We purifiied one of the binding factors from nuclear extracts to humogeneity, which was designated NF-10. Its molecular weight is - 40kDa. The experimets using photolyases specific for cyclobutane pyrimidine dimer and (6-4) photoproduct revealed that the NF-10 protein binds to UV-DNA though (6-4) photoproducts.
By using a monoclonal antibody raised against the NF-10 protein, we could show the existence of the NF-10 protein in all xeroderma pigmentosum complementation group cell lines. This result suggests us that NF-10 is a novel protein different from XPA protein and UV-DNA binding factor previously reported. The immunodepletion of NF-10 protein from cell extract by the antibody decreased the in vitro repair activity, whereas the additon of the protein recovered it.
The partial peptide sequences of the protein are almost identical to human glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPD). The purified NF-10 protein exerted the GAPD activuty in glycolysis. These results suggest that the GAPD may play a function in nucleotide excision repair as well as in glycolysis, probably in the damage recognition process.
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 本研究では、紫外線によって照射されたヒト細胞におけるDNA修復過程をタンパク分子レベルで研究することを目的とした。ヒト細胞核抽出液中から損傷の認識に携わるタンパクを分離するため、紫外線照射されたDNA断片によるゲルシフト法を用いて実験を行った。
HeLa細胞核抽出液をヘパリン・カラムで分画したところ、第10番分画(NF-10)に紫外線照射DNAに結合するタンパク分子が存在していた。さらに精製を進めたところ、ポリアクリルアミド電気泳動で約40kDaの分子量を示す単一タンパク分子を得た。この精製NF-10タンパクは、紫外線損傷を有するDNAに特異的に結合した。その結合は紫外線によってDNAに生成された(6-4)光産物を介することが分かった。ついでNF-10タンパクを特異的に認識するモノクローナル抗体を樹立し、試験管内修復系に添加したところ、修復合成が抑制された。また、XPの全ての相補性群細胞抽出液にNF-10タンパクが存在していたことから、このタンパクはこれまでに報告されていない新しい損傷認識タンパクであることが分かった。
NF-10タンパクのアミノ酸配列を解析したところ、グリセラデルハイド3'-フォスフェート・デハイドロゲナーゼ(GAPD)と一致した。またNF-10タンパクはGAPD活性を示した。GAPDの補酵素であるNADP^+がNF-10タンパクと紫外線照射DNAとの結合を競合的に阻害したことから、NF-10タンパクはNADP^+分子種を認識すると同様な機構でDNA中の(6-4)光産物を認識していることが示唆された。今後は、NF-10タンパクに結合する関連タンパクの分離を行ない、NF-10タンパクの紫外線損傷修復過程への関与について詳細な解析を行う予定である。
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:06454637, 研究期間(年度):1994-1995
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:研究課題「ヒトにおける紫外線損傷修復機構のタンパクレベルの研究」課題番号06454637
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-06454637/064546371995kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=60019669
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=60019669
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06454637/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06454637/
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-06454637/064546371995kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-06454637/064546371995kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
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