{"created":"2023-07-27T06:57:06.811988+00:00","id":54164,"links":{},"metadata":{"_buckets":{"deposit":"3c6e889a-8cdd-4f15-8221-f9c0013f5e5e"},"_deposit":{"created_by":18,"id":"54164","owners":[18],"pid":{"revision_id":0,"type":"depid","value":"54164"},"status":"published"},"_oai":{"id":"oai:kanazawa-u.repo.nii.ac.jp:00054164","sets":["2812:2813:2829"]},"author_link":["95626","48210"],"item_9_biblio_info_8":{"attribute_name":"書誌情報","attribute_value_mlt":[{"bibliographicIssueDates":{"bibliographicIssueDate":"2016-04-21","bibliographicIssueDateType":"Issued"},"bibliographicPageStart":"1p.","bibliographicVolumeNumber":"2003 – 2004","bibliographic_titles":[{"bibliographic_title":"平成16(2004)年度 科学研究費補助金 萌芽研究 研究概要"},{"bibliographic_title":"2004 Research Project Summary","bibliographic_titleLang":"en"}]}]},"item_9_creator_33":{"attribute_name":"著者別表示","attribute_type":"creator","attribute_value_mlt":[{"creatorNames":[{}],"nameIdentifiers":[{},{}]}]},"item_9_description_21":{"attribute_name":"抄録","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"昨年度までにトリBリンパ細胞株DT40から得たmiR17-5P(miR91),miR17-3P(miR17),miR18,miR19a, miR20,miR19b, miR92の7種類のmiRNA遺伝子が密集して存在する遺伝子クローンについて、miRNA遺伝子群を含む1.9kbpをpuromycinおよびblasticidin S耐性遺伝子で置き換えたノックアウトコンストラクトを構築し、エレクトロポレーション法によってDT40細胞に順次導入し、それぞれの抗生剤の存在下培養することにより、これらのmiRNA遺伝子を完全に欠失した細胞株を得ることに成功した。変異遺伝子を導入した親株は野性株であることから、この遺伝子群は細胞の増殖には必須でないことが明らかになった。\n得られたノックアウト細胞株と親株(野性株)とを比較すると、形態的には殆ど変わることはなかった。一方、細胞の増殖速度はノックアウト細胞株で有意に遅くなっていた。各細胞株から全RNAを抽出し、ポリアクリルアミドゲル電気泳動後、各miRNAに対するプローブを用いてノーザンハイブリダイゼーションを行った。その結果、ノックアウト細胞株ではmiR17-3P及びmiR20の発現が完全に消失していた。しかし、他の5種類のmiRNAの発現は野性株と比較して減少しているものの、完全に消失するまでには至らなかった。これはそれぞれのmiRNAと類似した、あるいは完全に一致した塩基配列を持つmiRNA遺伝子が他に存在することによるものと考えられる。\n本研究により、2種類のmiRNAの発現が完全に押さえられた細胞株が得られた。この細胞株および野性株で発現しているタンパク質を、二次元マッピングなどで比較することにより、これらのmiRNAのターゲットを特定することができるものと考えられる。","subitem_description_type":"Abstract"}]},"item_9_description_22":{"attribute_name":"内容記述","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"研究課題/領域番号:15657039, 研究期間(年度):2003 – 2004","subitem_description_type":"Other"},{"subitem_description":"出典：「遺伝子ノックアウトを用いたmiRNAの機能及び生成機構の解析」研究成果報告書　課題番号15657039\n（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））\n（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15657039/)を加工して作成","subitem_description_type":"Other"}]},"item_9_description_5":{"attribute_name":"提供者所属","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"金沢大学がん進展制御研究所","subitem_description_type":"Other"}]},"item_9_identifier_registration":{"attribute_name":"ID登録","attribute_value_mlt":[{"subitem_identifier_reg_text":"10.24517/00060441","subitem_identifier_reg_type":"JaLC"}]},"item_9_relation_28":{"attribute_name":"関連URI","attribute_value_mlt":[{"subitem_relation_name":[{"subitem_relation_name_text":"https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=40124424"}],"subitem_relation_type_id":{"subitem_relation_type_id_text":"https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=40124424","subitem_relation_type_select":"URI"}},{"subitem_relation_name":[{"subitem_relation_name_text":"https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15657039/"}],"subitem_relation_type_id":{"subitem_relation_type_id_text":"https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15657039/","subitem_relation_type_select":"URI"}}]},"item_9_version_type_25":{"attribute_name":"著者版フラグ","attribute_value_mlt":[{"subitem_version_resource":"http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa","subitem_version_type":"AM"}]},"item_files":{"attribute_name":"ファイル情報","attribute_type":"file","attribute_value_mlt":[{"accessrole":"open_date","date":[{"dateType":"Available","dateValue":"2021-02-19"}],"displaytype":"detail","filename":"CA-PR-HARADA-F-kaken 2016-1p.pdf","filesize":[{"value":"118.3 kB"}],"format":"application/pdf","licensetype":"license_11","mimetype":"application/pdf","url":{"label":"CA-PR-HARADA-F-kaken 2016-1p.pdf","url":"https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/record/54164/files/CA-PR-HARADA-F-kaken 2016-1p.pdf"},"version_id":"820b8ccd-bb92-460b-b62d-203b179bbc4b"}]},"item_language":{"attribute_name":"言語","attribute_value_mlt":[{"subitem_language":"jpn"}]},"item_resource_type":{"attribute_name":"資源タイプ","attribute_value_mlt":[{"resourcetype":"research report","resourceuri":"http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws"}]},"item_title":"遺伝子ノックアウトを用いたmiRNAの機能及び生成機構の解析","item_titles":{"attribute_name":"タイトル","attribute_value_mlt":[{"subitem_title":"遺伝子ノックアウトを用いたmiRNAの機能及び生成機構の解析"}]},"item_type_id":"9","owner":"18","path":["2829"],"pubdate":{"attribute_name":"公開日","attribute_value":"2021-02-19"},"publish_date":"2021-02-19","publish_status":"0","recid":"54164","relation_version_is_last":true,"title":["遺伝子ノックアウトを用いたmiRNAの機能及び生成機構の解析"],"weko_creator_id":"18","weko_shared_id":-1},"updated":"2023-07-27T14:28:33.201004+00:00"}