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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成17(2005)年度

立体構造解析に基づくWASP・WAVEファミリータンパク質の機能制御

https://doi.org/10.24517/00061085
https://doi.org/10.24517/00061085
8318b5dc-7cc9-43d7-966b-17453ee32a2b
名前 / ファイル ライセンス アクション
ME-PR-OKISHIO-N-kaken ME-PR-OKISHIO-N-kaken 2016-2p.pdf (127.7 kB)
license.icon
アイテムタイプ 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2021-12-02
タイトル
タイトル 立体構造解析に基づくWASP・WAVEファミリータンパク質の機能制御
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00061085
ID登録タイプ JaLC
著者 置塩, 信行

× 置塩, 信行

WEKO 62509
e-Rad 20262561
研究者番号 20262561

置塩, 信行

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提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 金沢大学医薬保健研究域医学系
書誌情報 平成17(2005)年度 科学研究費補助金 若手研究(B) 研究概要
en : 2005 Research Project Summary

巻 2003 – 2005, p. 2p., 発行日 2016-04-21
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 アクチン重合を制御し、細胞骨格構築に関与するN-WASP [neural-WASP (Wiskott-Aldrich syndrome protein)]およびWAVE(WASP family verprolin-homologous protein)の活性制御メカニズムを明らかにするために、それらの調節因子WISH(WASP interacting SH3 protein)、Endophilin、IRSp53(insulin receptor substrate p53)のSH3ドメインに注目し、これらSH3ドメインの大腸菌を用いた大量発現・精製系の構築を試みた。いずれのSH3ドメインも、GSTタグを付加する発現プラスミドの構築には問題がなかった。しかしながら、WISH SH3では、発現タンパク質の大部分が不溶性であり、Endophilin SH3では、Cys残基を含むためか、発現タンパク質の一部が、非還元状態で二量体化しており、いずれの場合も、以後の実験に用いるには適さなかった。またEndophilin SH3では、Cys残基をSer残基に置換した変異体を作成したが、変異によって可溶性が低下するため、大量発現・精製には不向きであった。一方、IRSp53 SH3では、Cys残基を含まず、充分量の可溶性タンパクを得ることができた。ファージディスプレイライブラリー法を用いて、IRSp53 SH3が認識する配列を調べたところ、NRPVAPPLPFWLの配列を得た。CDを用いて、IRSp53 SH3と合成ペプチドAc-NRPV APPLPFWL-NH_2の親和性(Kd値)を調べたところ、約20-40μMであった。NMRを用いて、IRSp53 SH3の^<15>N-^1H HSQCスペクトルを測定したところ、残基間でシグナル強度の不均一が見られたため、残念ながら、構造決定を行うことができなかった。
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:15790147, 研究期間(年度):2003 – 2005
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:「立体構造解析に基づくWASP・WAVEファミリータンパク質の機能制御」研究成果報告書 課題番号15790147
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15790147/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=20262561
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=20262561
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15790147/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15790147/
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Ver.1 2023-07-27 14:07:39.954573
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