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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成16(2004)年度

ポリユビキチン化基質蛋白質の網羅的同定

https://doi.org/10.24517/00061116
https://doi.org/10.24517/00061116
6ec258bc-6729-4b06-8f45-e7438765186e
名前 / ファイル ライセンス アクション
CA-PR-OTA-K-kaken CA-PR-OTA-K-kaken 2016-1p.pdf (144.5 kB)
license.icon
Item type 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2021-05-27
タイトル
タイトル ポリユビキチン化基質蛋白質の網羅的同定
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00061116
ID登録タイプ JaLC
著者 太田, 一寿

× 太田, 一寿

WEKO 95720
e-Rad 00322727

太田, 一寿

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提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 東京大学 / 金沢大学
書誌情報 平成16(2004)年度 科学研究費補助金 若手研究(B) 研究概要
en : 2004 Research Project Summary

巻 2003 – 2004, p. 1p., 発行日 2016-04-21
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 蛋白質のユビキチン化は、プロテアソームによる分解や、エンドサイトーシスなどの様々な生命現象を調節する重要な翻訳後修飾の一つである。従来のユビキチン化基質の同定は場当たり的で、サイクリンなどの一部の蛋白質群に集中していたが、近年、出芽酵母を用いた網羅的基質同定の結果が海外の研究グループより報告され、プロテオミクス解析へとそのフィールドを移した感がある。そこで、我々も、以前から開発してきたユビキチン化基質蛋白質の網羅的検出システムの独自性をアピールするとともに、その基質プロファイリングへの応用を試みた。
<実験結果>
昨年度に引き続き、ポリユビキチン化蛋白質を優先的に濃縮できる「パラレルタグ(PAP)法」の改良・応用を行ってきた。PAP法とは我々が独自に考案した方法で、それぞれが異なるタグで標識されたユビキチンを同時に発現させてポリユビキンチン鎖に2種類のタグを取り込ませ、次にそれぞれのタグに対するアフィニティ精製を連続して行うシステムである。これにより、ポリユビキチン化蛋白質を選択的、高純度に精製する事が可能となる。
実際に、PAP法で得られたサンプルをLC/MS/MSで解析したところ、既知のものを含め130種以上の基質蛋白質候補が同定された。そこでそのうち新規のものに個別に検討を加えたところ、約80%程度においてユビキチン化が確認され、中には刺激によるユビキチン化の程度に変動が認められたものもあった。
また、基質プロファイリングへの第一歩として、F-box蛋白質:MET30p過剰発現下での基質蛋白質:MET4pのPAP法による濃縮状況を調べたところ、MET30p依存的なユビキチン化MET4p収量の増減を認め、網羅的プロファイリングへの応用が可能であると判断した。
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:15790148, 研究期間(年度):2003 – 2004
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:「ポリユビキチン化基質蛋白質の網羅的同定」研究成果報告書 課題番号15790148
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15790148/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=00322727
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=00322727
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15790148/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15790148/
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Ver.1 2023-07-27 14:27:34.666165
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