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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成17(2005)年度

気道炎症における細胞質型ホスホリパーゼA2の役割とそのリン酸化部位の決定

https://doi.org/10.24517/00063104
https://doi.org/10.24517/00063104
87fe482f-355d-4747-ae6f-e61513e6cd06
名前 / ファイル ライセンス アクション
ME-PR-MYOU-S-kaken ME-PR-MYOU-S-kaken 2016-2p.pdf (137.5 kB)
license.icon
アイテムタイプ 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2021-11-08
タイトル
タイトル 気道炎症における細胞質型ホスホリパーゼA2の役割とそのリン酸化部位の決定
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00063104
ID登録タイプ JaLC
著者 明, 茂治

× 明, 茂治

WEKO 99436
e-Rad 20313645

明, 茂治

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提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 金沢大学医学系研究科
書誌情報 平成17(2005)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究概要
en : 2005 Research Project Summary

巻 2004 – 2005, p. 2p., 発行日 2016-04-21
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 細胞質型ホスホリパーゼA_2(cPLA_2)の522番目のアミノ酸までの蛋白は優位抑制型cPLA_2(dn-cPLA_2)として作用することが報告されていることから,dn-cPLA_2のcDNAをcPLA_2のcDNAを含むpCRII-cPLA_2からPCRにて増幅した後,TAT発現プラスミッドであるpTATのマルチクローニングサイトに挿入し,pTAT-dn-cPLA_2を作製した.また,同様にcPLA_2のcDNAをPCRによって増幅した後にpTATに挿入し,pTAT-cPLA_2を作製した.さらに,site-directed mutagenesisによって,cPLA_2のSer^<505>,Ser^<515>およびSer^<727>をアラニンに置換させたプラスミッド(それぞれ,pTAT-S505A-cPLA_2,pTAT-S515A-cPLA_2およびpTAT-S727A-cPLA_2)を作製した.プラスミッドをBL21大腸菌に導入し培養した後に,buffer Z(8 M urea,20mM HEPES,pH8.0,100mM NaCl)を溶媒としてソニケーションを行い,遠心の後に上清を回収しNi-NTAカラムに通した.イミダゾールにて抽出を行い,ポアサイズが10kDaの透析膜(10,000MWCO Slide-A-Lyzer^<【○!R】>)を用いて,ureaとイミダゾールの除去を行った.また,コントロール蛋白として,特別な機能を有さないとされる蛍光色素であるgreen fluorescent protein(GFP)とTATの融合蛋白(TAT-GFP)を作製した.
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:16590742, 研究期間(年度):2004 – 2005
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:「気道炎症における細胞質型ホスホリパーゼA2の役割とそのリン酸化部位の決定」研究成果報告書 課題番号16590742
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-16590742/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://nrid.nii.ac.jp/ja/search/?kw=20313645
関連名称 https://nrid.nii.ac.jp/ja/search/?kw=20313645
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-16590742/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-16590742/
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Ver.1 2023-07-27 14:25:10.955437
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