@techreport{oai:kanazawa-u.repo.nii.ac.jp:00057654,
 month = {Mar},
 note = {EBVのBZLF1遺伝子は前早期蛋白であるZ蛋白を発現する遺伝子で、潜伏感染からウイルス複製にスイッチする遺伝子として知られ、最終的にはVCA(viral capsid antigen)を発現し、宿主細胞は死滅する。これまでの研究は、この原理を利用して上咽頭癌(NPC)において高率なBZLF1遺伝発現を行い、癌を治療する遺伝子治療の基礎的研究を行ってきた。一方でEBVの唯一の癌化遺伝子産物であり、リンパ球を不死化することが出来るLMP1蛋白についての解析を加えた。その結果、LMP1は転移に密接に関与するMMP-9を誘導することを報告した。そこで、転移抑制の立場から癌の治療ができないかを検討するために、癌の転移に何らかの関与が示唆されているいくつかの遺伝子をとりあげ、NPCにおけるそれらの発現とLMP-1の発現との関連性を調べた。
その結果、(1)HGF(Hepato Growth Factor)のレセプターで、各種細胞内伝達系を活性化し、様々な癌の増殖、転移との関連が知られているc-Metは、LMP1の発現頻度と相関がみられた。(2)血管新生因子としての作用が証明されているIL8の発現はLMP1の発現と相関した。(3)IFNγを誘導し、細胞性免疫抑制作用が知られているIL-10の発現はNPCの浸潤度に相関して高かった。(4)転写活性因子として知られているets-1遺伝子の発現は細胞運動能とも関係することから、MDCK細胞にets-1のdominannt negative formを発現させてやるとLMP1による運動能亢進は抑制された。しかし形質転換能は抑制できなかった。このように浸潤性、転移性と正の関連を有するLMP1発現の制御がNPCの治療では最も効果的であると結論された。最後に化学物質によるLMP1の発現抑制の可能性も検討したところ、アスピリンがLMP-1の発現を抑制することをin vitroの系で確認できた。以上、本研究において、NPCの遺伝子治療の方向性として、一つはウイルス複製のスイッチ遺伝子BZLF1の発現、もう一つの可能性としてLMP1の発現抑制が効果的と結論された。, Nasopharyngeal carcinoma (NPC), an epithelial tumor which is characterized by marked geographic and population differences in incidence, is found to be associated with Epstein-Barr virus (EBV) by serologic evidence, and the relationship was confirmed by the detection of EBVDNA and EB-encoded RNAs in NPC cells. While, NPC is highly metastatic carcinoma whose consistent associated with EBV has been established. Latent membrane protein 1 (LMP1), an EBV membrane protein expressed in latent infection is considered to be the EBV oncoprotein. Matrix metalloproteinase 9 (MMP9), one of the MMP families, degrades Type IVcollagen, a major 4 component of extracellural matrix and is believed to be crucial for cancer invasion and metastasis. Although MMP9 is reported to be expressed in a variety of cancers, no reports concerning NPC have been published. We have shown that LMP1 induces MMP9 in vitro cell line, which suggests the possibility of mechanism in which LMP1 of EBV contributes to the metastasis and tumorgenesis of NPC by the induction of MMP9. Then the expression of LMP1 and MMP9 were immunohistochemically examined in 38 NPCs sections, and the relation of these proteins was statistically analyzed. We also analyzed the association of these proteins with clinical features. As results, both LMP1 and MMP9 proteins were predominantly immunolocalized in cancer nests. The expression of MMP9 showed a significant positive correlation with the expression of LMP1. Also the expression of MMP9 correlated with lymphnode metastasis.
We also demonstrated that LMP1 enhances MMP9 expression by activation of nuclear factor ( NF) κ B and activator protein (AP)-1 . We therefore tested whether upregulation of MMP9 by LMP1 could be correlated with enhanced invasiveness of tumor cells in vitro. Whether aspirin and sodium salicylate could reduce invasiveness and whether LMP1 could enhance MMP9 expression in tumors grown in nude mice were also tested. C33A cells stably expressing LMP1 had increased expression of MMP9 and showed greater invasion through reconstituted basement membrane compared with vector-transfected C33A cells. Treatment with aspirin and sodium salicylate inhibited invasiveness of the LMP1-expressing C33A cells and suppressed both the LMP1-induced MMP9expewssion in zymographic analyses and LMP1-induced MMP9 promoter activity in CAT reporter assays. The inhibitory effect of aspirin on NF- κ B activity was attributable to the inhibition of l-κ B kinase activity. Finally, tumors derived from vector-transfected C33A cells stably expressing LMP1 grown in nude mice showed enhanced MMP9 levels compared with tumors derived from vector-trancfected C33A cells. This enhancement was inhibited by treatment of the mice with aspirin. These results suggest that aspirin may be able to suppress invasion and metastasis of EBV-associated tumors that express LMP1 by suppression of MMP-9., 研究課題/領域番号:10470353, 研究期間(年度):1998 – 2000, 出典：「上咽頭癌の遺伝子治療法を目的とした基礎的研究」研究成果報告書　課題番号10470353
（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））
（https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-10470353/104703532000kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/)を加工して作成, 金沢大学医学部},
 title = {上咽頭癌の遺伝子治療法を目的とした基礎的研究},
 year = {2002}
}