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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成13(2001)年度

生体分子モーターF1におけるATPase反応と力学反応の同時計測

https://doi.org/10.24517/00064413
https://doi.org/10.24517/00064413
08ad1301-1709-4885-b8a3-761d7582e402
名前 / ファイル ライセンス アクション
SC-PR-SAITO-K-kaken SC-PR-SAITO-K-kaken 2016-2p.pdf (147.7 kB)
license.icon
アイテムタイプ 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2021-11-19
タイトル
タイトル 生体分子モーターF1におけるATPase反応と力学反応の同時計測
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00064413
ID登録タイプ JaLC
著者 斎藤, 究

× 斎藤, 究

WEKO 98345
e-Rad 70301190

斎藤, 究

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提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 金沢大学理工研究域
書誌情報 平成13(2001)年度 科学研究費補助金 奨励研究(A) 研究概要
en : 2001 Research Project Summary

巻 2000 – 2001, p. 2p., 発行日 2016-04-21
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 モータータンパク質分子であるATP合成酵素F1の動作メカニズムを解明するために、ATP加水分解反応と回転運動を1分子レベルで同時観察する事を試みた。
現在所有するエバネッセント場照明蛍光顕微鏡では、蛍光色素1分子の水溶液中、実時間観察が可能である。蛍光性ATPアナログ、Cy3-ATPを使うことにより、カバーガラス表面上に固定した1分子のF1によるATP加水分解反応を観察した。ガラス表面上に輝点として観察されるCy3-ATPの密度はガラス表面に固定したF1の濃度に比例した。また、Cy3-ATPの結合解離の時定数を調べてみると、溶液中の計測から報告されている時定数と良い一致を示した。以上の二つの点は、ATP合成酵素F1による1分子化学反応が可視化されたことを示している。
遺伝子工学の手法で作成した大腸菌のF1を使って、F1の回転運動観察実験を行った。F1中央のγサブユニットにストレプトアビジンを介して蛍光標識したアクチンフィラメントを結合させた。溶液中にATPを入れることにより、アクチンフィラメントの回転を観察した。
ATP加水分解に伴うエネルギーを考える上では、分解産物であるADPとリン酸の濃度が大きく影響する。F1のATP加水分解反応を計測する際、溶液中のADP及びリン酸の濃度を変えてATP加水分解反応速度を計測し、ADP及びリン酸による阻害の効果について情報を得た。
次年度以降は、ATP加水分解反応観察系、回転運動観察系で得られる同時観察データと、本年度に得られた生化学的なデータを組み合わせ、化学反応と力学反応の同時観察に迫り、F1の物理化学的な特性に迫りたい。
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:12780490, 研究期間(年度):2000-2001
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:「生体分子モーターF1におけるATPase反応と力学反応の同時計測」研究成果報告書 課題番号 12780490(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-12780490/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=70301190
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=70301190
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-12780490/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-12780490/
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Ver.1 2023-07-27 14:18:37.033172
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