{"created":"2023-07-27T06:59:57.740302+00:00","id":59721,"links":{},"metadata":{"_buckets":{"deposit":"72263d9a-5b56-4a73-8f02-973239d4e824"},"_deposit":{"created_by":18,"id":"59721","owners":[18],"pid":{"revision_id":0,"type":"depid","value":"59721"},"status":"published"},"_oai":{"id":"oai:kanazawa-u.repo.nii.ac.jp:00059721","sets":["2812:2813:2836"]},"author_link":["77179","53"],"item_9_biblio_info_8":{"attribute_name":"書誌情報","attribute_value_mlt":[{"bibliographicIssueDates":{"bibliographicIssueDate":"2016-04-21","bibliographicIssueDateType":"Issued"},"bibliographicPageStart":"2p.","bibliographicVolumeNumber":"1997","bibliographic_titles":[{"bibliographic_title":"平成9(1997)年度 科学研究費補助金 重点領域研究 研究概要"},{"bibliographic_title":"1997 Research Project Summary","bibliographic_titleLang":"en"}]}]},"item_9_creator_33":{"attribute_name":"著者別表示","attribute_type":"creator","attribute_value_mlt":[{"creatorNames":[{}],"nameIdentifiers":[{},{},{},{}]}]},"item_9_description_21":{"attribute_name":"抄録","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"XPGとXPE-ERCC1タンパクは、ヌクレオチド除去修復(NER)機構においてそれぞれ3′,5′切断酵素として働くが、本来はバブルやループなどの特殊なDNA構造を基質とするエンドヌクレアーゼである。これらの遺伝子(XPGあるいはERCC1)を欠損したマウスはいづれも成長阻害を示し、離乳前にすべて死亡する。本研究では、この両エンドヌクレアーゼのNER機構以外での機能に着目し、その本体を明らかにすることを目的とした。本年度の主な研究成果は以下のとおりである。\n1.バキュロウィルス/昆虫細胞系を用いてXPGタンパクを高発現させ、3種のカラムステップにより精製した。様々なDNA基質を用いて切断活性を調べたところ、1-3ntのバブル(塩基ミスマッチ)型DNA基質に対しても切断活性を示すことが明らかとなった。また、3ntのループ(IDミスマッチ)型DNA基質に対する切断活性も認められ、酵素活性的にはDNA中に生じたミスマッチ部分に対してXPGが働き得る可能性が示唆された。\n2.放医研の塩見らによって樹立されたxpgノックアウトマウス胎児由来細胞を継代培養したところ、最初は正常あるいはヘテロ細胞より増殖率が低かったものの、途中から急激に増殖率が上昇し、正常やヘテロ由来細胞よりも早く株化した。4継代ごとに細胞よりDNAを抽出して、マイクロサテライト解析を行ったところ、調べた8種類のプライマーのうち2種類で継代に伴ったバンドパターンの変化が観察された。\n3.酵母のTwo-hybridシステムを用いてXPGタンパクと相互作用する可能性のある4つのクローンを分離した。現在、塩基配列の決定、ならびに各相互作用についてのin vitroでの確認を行っている。\n4.MBP-XPG、あるいはMBP-ERCC1を抗原としてマウスに免疫を行い、これまでにXPGタンパクに対するモノクローナル抗体を4種類樹立した。","subitem_description_type":"Abstract"}]},"item_9_description_22":{"attribute_name":"内容記述","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"研究課題/領域番号:09269207, 研究期間(年度):1997","subitem_description_type":"Other"},{"subitem_description":"出典:研究課題「除去修復エンドヌクレアーゼ機能とその欠損による原子病態の生化学的解析 」課題番号09269207\n(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所)) \n(https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09269207/)を加工して作成","subitem_description_type":"Other"}]},"item_9_description_5":{"attribute_name":"提供者所属","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"金沢大学薬学部","subitem_description_type":"Other"}]},"item_9_identifier_registration":{"attribute_name":"ID登録","attribute_value_mlt":[{"subitem_identifier_reg_text":"10.24517/00065976","subitem_identifier_reg_type":"JaLC"}]},"item_9_relation_28":{"attribute_name":"関連URI","attribute_value_mlt":[{"subitem_relation_name":[{"subitem_relation_name_text":"https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=60192340"}],"subitem_relation_type_id":{"subitem_relation_type_id_text":"https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=60192340","subitem_relation_type_select":"URI"}},{"subitem_relation_name":[{"subitem_relation_name_text":"https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09269207/"}],"subitem_relation_type_id":{"subitem_relation_type_id_text":"https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09269207/","subitem_relation_type_select":"URI"}}]},"item_9_version_type_25":{"attribute_name":"著者版フラグ","attribute_value_mlt":[{"subitem_version_resource":"http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa","subitem_version_type":"AM"}]},"item_files":{"attribute_name":"ファイル情報","attribute_type":"file","attribute_value_mlt":[{"accessrole":"open_date","date":[{"dateType":"Available","dateValue":"2022-05-12"}],"displaytype":"detail","filename":"PH-PR-MATSUNAGA-T-kaken 2016-207-2p.pdf","filesize":[{"value":"149.4 kB"}],"format":"application/pdf","licensetype":"license_11","mimetype":"application/pdf","url":{"label":"PH-PR-MATSUNAGA-T-kaken 2016-207-2p.pdf","url":"https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/record/59721/files/PH-PR-MATSUNAGA-T-kaken 2016-207-2p.pdf"},"version_id":"ce13b8b5-0fa3-4ced-82f1-7eaad159e7cd"}]},"item_language":{"attribute_name":"言語","attribute_value_mlt":[{"subitem_language":"jpn"}]},"item_resource_type":{"attribute_name":"資源タイプ","attribute_value_mlt":[{"resourcetype":"research report","resourceuri":"http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws"}]},"item_title":"除去修復エンドヌクレアーゼ機能とその欠損による原子病態の生化学的解析","item_titles":{"attribute_name":"タイトル","attribute_value_mlt":[{"subitem_title":"除去修復エンドヌクレアーゼ機能とその欠損による原子病態の生化学的解析"}]},"item_type_id":"9","owner":"18","path":["2836"],"pubdate":{"attribute_name":"公開日","attribute_value":"2022-05-12"},"publish_date":"2022-05-12","publish_status":"0","recid":"59721","relation_version_is_last":true,"title":["除去修復エンドヌクレアーゼ機能とその欠損による原子病態の生化学的解析"],"weko_creator_id":"18","weko_shared_id":-1},"updated":"2023-07-27T13:07:49.258371+00:00"}