@techreport{oai:kanazawa-u.repo.nii.ac.jp:00060165, month = {Mar}, note = {ヒト癌遺伝子導入で形質転換したras/mycSFME細胞からBalb/cマウスで肺への転移性のある新細胞r/mHM-SFME-1を作出した。そこで、両細胞を通常の平板培養した場合と軟寒天中で立体培養した場合について、細胞の接着性と細胞骨格およびそれらの関係を調べて相互に検討し、細胞行動をもとにして転移を解析した。結果は以下の様であった。 1.平板培養では両細胞ともプラスチックへの接着部にadhesion plaque様のファロイジン可染部が観察され接着構造にはアクチン繊維が含まれることが解かった。 2.ras/mycSFME細胞は境界のはっきりした軟寒天コロニーを形成するが、r/mHM-SFME-1では散在性の細胞集塊となる。 3.両細胞それぞれの細胞間接着に関わるカドヘリンの発現は、どちらの細胞でもE、P、Nどの型とも培養の違いに関わらず微弱で違いは認められなかった。 4.ファロイジン染色と共焦点レーザー走査顕微鏡による検討で、細胞骨格に関わるアクチン繊維は、ras/mycSFME細胞では細胞の周辺部とより深部に比較的長いアクチン繊維の束が観られたのに対して、r/mHM-SFME-1細胞では分布は細胞膜直下に限られ、薄いネットワークとして観察された。 5.電子顕微鏡で解析すると、ras/mycSFME細胞では隣接細胞同士は互いに広く接触し、細胞間のadherens junctionも連続的に存在する。アクチン繊維はこのjunction直下と比較的長い細胞質突起の内部に密に存在する。r/mHM-SFME-1細胞では、細胞間隙が広くて接触部は少なく、adherens junctionの形成は散在的で繊維も疎に分布する。 これらのことから、転移性獲得に伴い細胞間接着と細胞骨格が変化しており、これが癌病巣からの細胞の離脱を招き転移の第一ステップになっている可能性が示唆された。, Distribution of actin-microfilaments in two cell lines, one is ras/mycSFME and the other is r/mHM-SFME-1, was studied in a colony forming conditions in agar gel. The later, which derived from former, shows highly metastatic potentials in host animals whereas the former shows lower activity. Both cells were transformed by human c-Ha-ras and mouse c-myc genes and produced colonies in soft agar. The r/mHM-SFME-1 colonies were consisted of loosely packed cells with dispersed satellite cells around the colony whereas ras/mycSFME ones were made of fairly compacted cells. Rhodamine-phalloidin staining showed that microfilaments of the two cells were present mainly at cell periphery. The distribution of microfilaments in this condition was more abundant in ras/mycSFME cells than in r/mHM-SFME-1 cells. The cell-cell adhesion developed well in former than in the later one. Actin-microfilaments were detected mainly at the cell-cell contacted area in ras/mycSFME cells, whereas they were forming thin network under the surface of r/mHM-SFME-1 cells. When these cells were cultured on fibronectin coated dishes, however, they expressed a fibrobrastic appearance and spread well on the dishes. Then, the phenotypic difference in metastatic potentials of the two cells could be demonstrated in the three-dimensional cultures in soft agar gel., 研究課題/領域番号:06670218, 研究期間(年度):1994 – 1995, 出典:研究課題「転移性を獲得した細胞の軟寒天中の行動と細胞接着及び細胞骨格の関係」課題番号06670218 (KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所)) (https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-06670218/066702181995kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/)を加工して作成, 金沢大学がん研究所}, title = {転移性を獲得した細胞の軟寒天中の行動と細胞接着及び細胞骨格の関係}, year = {1997} }