{"created":"2023-07-27T07:00:20.937612+00:00","id":60250,"links":{},"metadata":{"_buckets":{"deposit":"a77c2b9d-386d-437c-bd65-b483e1d5431b"},"_deposit":{"created_by":18,"id":"60250","owners":[18],"pid":{"revision_id":0,"type":"depid","value":"60250"},"status":"published"},"_oai":{"id":"oai:kanazawa-u.repo.nii.ac.jp:00060250","sets":["2812:2813:2834"]},"author_link":["77179","53"],"item_9_biblio_info_8":{"attribute_name":"書誌情報","attribute_value_mlt":[{"bibliographicIssueDates":{"bibliographicIssueDate":"2016-04-21","bibliographicIssueDateType":"Issued"},"bibliographicPageStart":"2p.","bibliographicVolumeNumber":"1999","bibliographic_titles":[{"bibliographic_title":"平成11(1999)年度 科学研究費補助金 萌芽的研究 研究課題概要"},{"bibliographic_title":"1999 Research Project Summary","bibliographic_titleLang":"en"}]}]},"item_9_creator_33":{"attribute_name":"著者別表示","attribute_type":"creator","attribute_value_mlt":[{"creatorNames":[{}],"nameIdentifiers":[{},{},{},{}]}]},"item_9_description_21":{"attribute_name":"抄録","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"1)リコンビナント修復関連因子の調製と各因子に対するモノクローナル抗体の作製\n当初、本研究で使用する修復関連因子としてDNA末端に結合するKu抗原、ミスマッチ塩基対に結合するMutS、バブルやループ構造に特異的に切断を入れるXPGやXPF-ERCCI等を想定したが、今年度はXPG,XPF-ERCC1に加えて、ヌクレオチド除去修復のDNA損傷結合因子であるXPA、XPC-hHR23Bをリコンビナントタンパクとして調製した(MutSは市販)。XPA以外は全てバキュロウィルス/昆虫細胞高発現系を利用し、XPA、XPF、ERCC1にはヒスチジン(His)のタグを付けた。一方、各因子に対するモノクローナル抗体は、抗XPGと抗ERCC1抗体(2種ずつ)を昨年度までに、抗XPA(3種)と抗XPC(1種)抗体を今年度新たに樹立した(抗His抗体は市販)。\n2)キャピラリー電気泳動法を用いたDNA損傷検出系の開発\n本研究では、修復関連因子とそれらに対する特異抗体、ならびにキャピラリー電気泳動装置を利用したDNA損傷検出系の開発を目指した。そこでまず、これまでに作製したシクロブタン型ピリミジン二量体に対するTDM-2モノクローナル抗体を利用して条件設定を試みた。紫外線(0-10J/m^2)を照射された細胞から抽出したDNA(熱変性したもの)をTDM-2抗体、Alexa^<TM>488で標識された抗マウスIgG(H+L)2次抗体と反応させた後、ノンコテーィリングシリカキャピラリーで分離した。488nmのアルゴンイオンレーザーで2次抗体の蛍光を検出したところ、DNA-TDM-2抗体-2次抗体の複合体に由来すると思われるピークが検出され、その面積は紫外線線量に依存して増加した。本年度は抗体を用いた予備実験しかできなかったが、キャピラリー電気泳動法を用いてDNA損傷を検出できる見通しが立ったため、今後は調製した各種修復関連因子と抗体を利用することにより、様々なDNA損傷の検出系へと応用していく予定である。","subitem_description_type":"Abstract"}]},"item_9_description_22":{"attribute_name":"内容記述","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"研究課題/領域番号:11878091, 研究期間(年度):1999","subitem_description_type":"Other"},{"subitem_description":"出典：研究課題「DNA修復関連因子を利用したDNA損傷検出系の開発」課題番号11878091\n（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） \n（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-11878091/）を加工して作成","subitem_description_type":"Other"}]},"item_9_description_5":{"attribute_name":"提供者所属","attribute_value_mlt":[{"subitem_description":"金沢大学薬学部","subitem_description_type":"Other"}]},"item_9_identifier_registration":{"attribute_name":"ID登録","attribute_value_mlt":[{"subitem_identifier_reg_text":"10.24517/00066498","subitem_identifier_reg_type":"JaLC"}]},"item_9_relation_28":{"attribute_name":"関連URI","attribute_value_mlt":[{"subitem_relation_name":[{"subitem_relation_name_text":"https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=60192340"}],"subitem_relation_type_id":{"subitem_relation_type_id_text":"https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=60192340","subitem_relation_type_select":"URI"}},{"subitem_relation_name":[{"subitem_relation_name_text":"https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-11878091/"}],"subitem_relation_type_id":{"subitem_relation_type_id_text":"https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-11878091/","subitem_relation_type_select":"URI"}}]},"item_9_version_type_25":{"attribute_name":"著者版フラグ","attribute_value_mlt":[{"subitem_version_resource":"http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa","subitem_version_type":"AM"}]},"item_files":{"attribute_name":"ファイル情報","attribute_type":"file","attribute_value_mlt":[{"accessrole":"open_date","date":[{"dateType":"Available","dateValue":"2022-06-24"}],"displaytype":"detail","filename":"PH-PR-MATSUNAGA-T-kaken 2016-2p.pdf","filesize":[{"value":"155.7 kB"}],"format":"application/pdf","licensetype":"license_11","mimetype":"application/pdf","url":{"label":"PH-PR-MATSUNAGA-T-kaken 2016-2p.pdf","url":"https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/record/60250/files/PH-PR-MATSUNAGA-T-kaken 2016-2p.pdf"},"version_id":"c75cbc4e-6127-4e71-9329-67f33bdc5c72"}]},"item_language":{"attribute_name":"言語","attribute_value_mlt":[{"subitem_language":"jpn"}]},"item_resource_type":{"attribute_name":"資源タイプ","attribute_value_mlt":[{"resourcetype":"research report","resourceuri":"http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws"}]},"item_title":"DNA修復関連因子を利用したDNA損傷検出系の開発","item_titles":{"attribute_name":"タイトル","attribute_value_mlt":[{"subitem_title":"DNA修復関連因子を利用したDNA損傷検出系の開発"}]},"item_type_id":"9","owner":"18","path":["2834"],"pubdate":{"attribute_name":"公開日","attribute_value":"2022-06-24"},"publish_date":"2022-06-24","publish_status":"0","recid":"60250","relation_version_is_last":true,"title":["DNA修復関連因子を利用したDNA損傷検出系の開発"],"weko_creator_id":"18","weko_shared_id":-1},"updated":"2023-07-27T12:46:14.978798+00:00"}