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イムノアフィニティークロマトグラフィーを用いる活性型ビタミンD_3分析法の開発
https://doi.org/10.24517/00066595
https://doi.org/10.24517/00066595d3633d57-1bec-4287-bfbe-25e4c870d005
| 名前 / ファイル | ライセンス | アクション |
|---|---|---|
PH-PR-KOBAYASHI-N-kaken 2018-2p.pdf (167.9 kB)
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.png)
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| Item type | 報告書 / Research Paper(1) | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 公開日 | 2022-07-01 | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | イムノアフィニティークロマトグラフィーを用いる活性型ビタミンD_3分析法の開発 | |||||
| 言語 | ||||||
| 言語 | jpn | |||||
| 資源タイプ | ||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws | |||||
| 資源タイプ | research report | |||||
| ID登録 | ||||||
| ID登録 | 10.24517/00066595 | |||||
| ID登録タイプ | JaLC | |||||
| 著者 |
小林, 典裕
× 小林, 典裕 |
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| 提供者所属 | ||||||
| 内容記述タイプ | Other | |||||
| 内容記述 | 金沢大学薬学部 | |||||
| 書誌情報 |
平成5(1993)年度 科学研究費補助金 奨励研究(A) 研究概要 en : 1993 Research Project Summary 巻 1993, p. 2p., 発行日 2018-06-07 |
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| 抄録 | ||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||
| 内容記述 | 【目的】活性型ビタミンD_3〔1,25(OH)_2D_3〕の血中レベルは、ビタミンD代謝異常を伴う各種疾患の診断指標として重要である。従来その測定は、主にニワトリ小腸あるいは受精卵十二指腸レセプターを用いるラジオレセプターアッセイ(RRA)により行われてきた。しかし、HPLCを含む多段階のクリーンアップ操作が不可欠で検体処理能力に難がある。この問題を解決するために、"タンデム"イムノアフィニティークロマトグラフィー(IAC)を新規な前処理法として開発し、そのヒト血漿RRAにおける有用性を検討した。 【実験・結果】11alpha-Hemiglutaryloxy-25(OH)D_3(1)又は25(OH)D_33-hemisuccinate(2)をハプテンとして得られた抗体を不溶化し,選択性の異なるイムノカラム2種(1及び2)を調製した。ヒト血漿のエーテル抽出物をカラム1にアプライし,25%MeCN溶出画分をカラム2に適用した。20%アセトンで洗浄後,95%MeOHで吸着物を溶出し,本画分における1,25(OH)_2D_3,D_3,25(OH)D_3,24,25(OH)_2D_3の回収率を求めた。その結果,それぞれ68,0.6,2.6,1.1%の値が得られ,本IACが十分な選択性を有することが示された。そこで,健常人血漿を本IACで前処理したのち十二指腸レセプターを用いるRRAに付したところ,従来の報告と符合する値(33.5±8.9pg/ml)が得られた。また,添加回収,段階希釈などの試験結果も良好で,本IAC/RRA法の信頼性が確認された。さらに,慢性腎不全患者血漿についても良好な測定値が得られ,本症の鑑別診断に有用なことが確認された。 【考察】今回開発した"タンデム"IACの導入により,HPLCの不必要な1,25(0H)_2D_3のRRAを開発することができた。本IACは精製効率と検体処理能力に優れ,RIA,GC-MSによる1,25(0H)_2D_3分析法の開発にも有用と期待される。 |
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| 内容記述 | ||||||
| 内容記述タイプ | Other | |||||
| 内容記述 | 研究課題/領域番号:05771953, 研究期間(年度):1993 | |||||
| 内容記述 | ||||||
| 内容記述タイプ | Other | |||||
| 内容記述 | 出典：研究課題「イムノアフィニティークロマトグラフィーを用いる活性型ビタミンD_3分析法の開発」課題番号05771953 （KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-05771953/）を加工して作成 |
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| 著者版フラグ | ||||||
| 出版タイプ | AM | |||||
| 出版タイプResource | http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa | |||||
| 関連URI | ||||||
| 識別子タイプ | URI | |||||
| 関連識別子 | https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=90205477 | |||||
| 関連名称 | https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=90205477 | |||||
| 関連URI | ||||||
| 識別子タイプ | URI | |||||
| 関連識別子 | https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-05771953/ | |||||
| 関連名称 | https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-05771953/ | |||||
