@techreport{oai:kanazawa-u.repo.nii.ac.jp:00060449,
 month = {Mar},
 note = {癌抑制遺伝子p53は17番染色体の短腕17p13.1に位置しており、その点突然変異とallelic lossによって機能が障害されることが知られている。本研究ではジゴキシゲニンで標識した17p13.1に特異的なコスミドプローブとビオチンで標識した17番染色体のcentomericプローブを用いてdual-color in situ hybridizationを行い、個々の胃癌細胞におけるp53遺伝子のコピー数を知るとともに、その相対的増減を観察した。またfluoresence in situ hybridizationの結果はSouthern blot法で検出した17p13.3のloss of heterozygosity(LOH)の有無、及びp53蛋白に対する抗体(RSP53)を使って免疫組織化学的に検出したp53蛋白の異常核内蓄積の有無と比較検討した。
各症例で150個以上の胃癌細胞を観察し60%以上の癌細胞でp53遺伝子のシグナルがcentromereのシグナルより少ない場合を欠失(+)とし、それ以外の場合を欠失(-)とした。尚、前者のシグナルが後者のシグナルより多い症例は認められなかった。
検索した42症例中、欠失を認めたものは15例であり、scirrhous carcinomaの1例を除いて全例にLOHを認めた。これらの症例では17p13.1の欠失によりallelic lossがおこっていると考えられた。欠失(-)であった27例中10例はdisomyでかつLOH(+)であり、17p13.3を含み17p13.1よりtelomere側のdeletionがおこっている可能性が示唆された。また11例はLOH、p53の核内蓄積いずれも認められず、p53遺伝子の異常は確認できなかった。残る4例ではLOH(-)にもかかわらずp53蛋白の異常核内蓄積が顕著に認められ、点突然変異による異常p53蛋白によるnegative dominantの機構が働いている可能性が強く示唆された。, To understand better the role of p53 deletion in gastric adenocarcinoma, 42 cases were examined by dual-color fluorescence in situ hybridization (FISH).
Probes for centromere 17 and the p53 locus (17p13.1) were hybridized simultaneously to interphase cancer cells to analyze p53 and chromosome 17 copy numbers on a cell by cell basis. The result was compared with the loss of heterozygosity (LOH) for probe YNZ22 at 17p13.3 detected by restriction fragment length polymorphism, and nuclear overexpression of p53 proteins examined immunohistochemically with anti-p53 protein antibody (RSP53). Delection was difined as when the fraction with decreased number for p53 gene signals compared with centromeric signals including monosomy fractions exceeded 60% of cell nuclei counted. Eleven of 15 cases showing deletion also showed LOH and nuclear overexpression of p53 protein. In these cases allelic loss was thought to be caused by physical deletion of 17p13.1 and point mutation of the remaining gene was highly suggestive. Five cases with neither deletion nor LOH had large population of cancer cells over-expressing p53 protein. This suggested mutant form of the p53 protein functioned in a dominant negative fashion in these cases. Other 10 cases without deletion showed LOH in spite of being disomic for both the centromeric and p53 probes. Remaining 12 cases showed neither deletion, LOH nor overexpression of p53 protein, thus it was very likely that p53 gene were not implicated in malignant progression in these cases. It was concluded that FISH is a useful tool to analyze aberrations of p53 gene in gastric adenocarcinoma., 研究課題/領域番号:05670170, 研究期間(年度):1993 – 1994, 出典：研究課題「FISHによる胃癌染色体17p(p53locus)の増減に関する研究」課題番号05670170
（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） 
（https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-05670170/056701701994kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/）を加工して作成, 金沢大学医学部},
 title = {FISHによる胃癌染色体17p(p53locus)の増減に関する研究},
 year = {1999}
}