WEKO3
アイテム
精子活性化ペプチドの作用機構
https://doi.org/10.24517/00067285
https://doi.org/10.24517/000672850c4c3dda-6828-449e-8059-e559d41d56c0
| 名前 / ファイル | ライセンス | アクション |
|---|---|---|
SC-PR-SUZUI-N-kaken 1993-2p.pdf (89.8 kB)
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.png)
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| Item type | 報告書 / Research Paper(1) | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 公開日 | 2022-10-27 | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | 精子活性化ペプチドの作用機構 | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | Mode of action of sperm-activating peptide | |||||
| 言語 | en | |||||
| 言語 | ||||||
| 言語 | jpn | |||||
| 資源タイプ | ||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws | |||||
| 資源タイプ | research report | |||||
| ID登録 | ||||||
| ID登録 | 10.24517/00067285 | |||||
| ID登録タイプ | JaLC | |||||
| 著者 |
鈴木, 範男
× 鈴木, 範男 |
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| 提供者所属 | ||||||
| 内容記述タイプ | Other | |||||
| 内容記述 | 金沢大学理学部 | |||||
| 書誌情報 |
平成4(1992)年度 科学研究費補助金 国際学術研究 研究成果報告書概要 en : 1992 Fiscal Year Final Research Report Summary 巻 1990 – 1992, p. 2p., 発行日 1993-03-23 |
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| 抄録 | ||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||
| 内容記述 | 精子活性化ペプチド(SAP)は構造と活性の特異性から次ぎの5種類に分けられる。 SAP-I Gly-Phe-Asp-Leu-Asn-Gly-Gly-Gly-Val-Gly SAP-IIA Cys-Val-Thr-Gly-Ala-Pro-Gly-Cys-Val-Gly-Gly-Gly-Arg-Leu-NH_2 SAP-IIB Lys-Leu-Cys-Pro-Gly-Gly-Asn-Cys-Val SAP-III Asp-Ser-Asp-Ser-Ala-Gln-Asn-Leu-Ile-Gly SAP-IV Gly-Cys-Pro-Trp-Gly-Gly-Ala-Val-Cys SAP-V Gly-Cys-G lu-Gly-Leu-Phe-His-Gly-Met-Gly-Asn-Cys SAP-Iの場合SAP-Iとその誘導体はより大きな前駆体タンパク質として卵巣内の栄養細胞で合成され,processingを受け成熟卵母細胞の周囲のゼリー層付加されるものと考えられる。SAPが精子細胞膜上の特異的受容体に結合すると,細胞膜上のリン酸化型グアニル酸シクラーゼが付活化され,直ちに脱リン酸化され,不活性化される。この脱リン酸化に伴って膜結合性グアニル酸シクラーゼのSDS電気泳動上の見かけの分子量が低下する。バフンウニ精子の膜結合性グアニル酸シクラーゼは構成アミノ酸1125残基のタンパク質として合成されるものと考えられる。この酸素の成熟タンパク質のリン酸化型は131kDaで脱リン酸化型は128kDaである。リン酸化型グアニル酸シクラーゼは約24molのリン酸を含み,脱リン酸化型は約4molのリン酸を含む。これらのリン酸はホスフォセリンとして存在するものと考えられる。バフンウニ精巣からクローニングされたグアニル酸シクラーゼcDNAの塩基配列から予測されるタンパク質の一次構造の解析及び他の膜結合性グアニル酸シクラーゼの一次構造との類似性から,バフンウニ精子の膜結合性グアニル酸シクラーゼは単一の膜貫通領域で分子がほぼ等分の細胞外,細胞内領域に分けられ,細胞内領域にはキナーゼ様領域と触媒領域が存在するものと推定される。キナーゼ様領域には9残基のセリンが,触媒領域には15残基のセリンが存在する。 グアニル酸シクラーゼの脱リン酸化,不活性化及びSDS電気泳動上の見かけの低分子化が連動した現象であることを着目し,プロテインホスファターゼの阻害剤存在下で精子ホモジェネートにSAP-Iを加え低分子化を指標として脱リン酸化(不活性化)に関与するプロテインホスファターゼの性質を検討した結果12μMのカリキュリンAが低分子化を約30%抑制し,かつグアニル酸シクラーゼ活性を高いレベルに維持する作用があることを見いだした。オカダ酸,ミクロシスチン-LRはSAP-Iによって誘起されるグアニル酸シクラーゼの低分子化及びそれに伴う不活性化には顕著な効果を示さなかった。 酸素活性の測定及びSAP-I架橋実験の結果からグアニル酸シクラーゼ及びSAP-I結合タンパク質は精子尾部に局在していることが明かにされたが,精子尾部に存在するCa^<2+>非依存性プロテインホスファターゼは分子量の違いから3種類(250kDa,43kDa,30kDa),オカダ酸に対する感受性の違いから2種類存在することが本研究で明かにされたが,これだけでは上記のホモジェネートを用いた実験結果を説明することができないことから,グアニル酸シクラーゼの脱リン酸化を特異的に起こすプロテインホスファターゼの検索をするために基質となるグアニル酸シクラーゼ(部分精製の脱リン酸化型酵素)をcAMP依存性プロテインキナーゼの触媒サブユニットと[r-^<32>P]ATPによる再リン酸化を試みたが成功しなかった。 膜結合性グアニル酸シクラーゼを特異的にリン酸化する精子細胞内の内在性キナーゼを検索する過程で,バフンウニ精子の1%CHAPS可溶化画分中にセリン残基が特異的にリン酸化される48kDaタンパク質を見いだした。[r-^<32>P]ATPでリン酸化される精子ホモジェネート中の48kDaタンパク質は反応液中に生理的濃度のcAMP,cGMPを加えることによって特異的に脱リン酸化された。精製の結果この48kDaタンパク室は等量の39kDaタンパク質と会合しており,native状態では400kDaの大きさのタンパク質として存在していることが明らかになった。48kDaタンパク質に対する抗体を作成し,これを用いて,λgt11-バフンウニ精巣cDNAライブラリーよりイムノスクリーニングした結果3.3kbのcDNAクローンが得られた。このcDANの塩基配列はマウス脳皮質に局在するDN38mRNAと60%のホモロジーがあった。 |
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| 抄録 | ||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||
| 内容記述 | In the past decade, we purified 74 sperm-activating peptides from the egg jelly of 17 species of sea urchins distributed over five taxonomic orders. These peptides show essentially the same biological effects on sea urchin spermatozoa although the biological effects and structures of the peptides are specific at the ordinal level. With regard to that specificity, these peptides can be classified into five groups. Sperm-activating peptide I (SAP-I : GFDLNGGGVG) crosslinked specifically to a 71 kDa protein and induced an electrophoretic mobility change in the guanylate cyclase of Hemicentrotus pulcherrimus sperm plasma membrane with concomitant dephosphorylation and inactivation of the enzyme. The dephosphorylation and subsequent inactivation of the enzyme were inhibited in the presence of calyculin A. The phosphorylated and dephosphorylated forms of the guanylate cyclase contained about 24 and 4 moles of phosphate per mol protein, respectively. A cDNA clone for the gudnylate cyclase has been isolated from a cDNA library for H. pulcherrimus testes. An open reading frame predicted a protein of 1125 amino acids including an apparent signal peptide of 21 residues ; a single transmembrane domain of 25 amino acids divided the mature protein into an amino-terminal, extracellular domain of 485 amino acids and carboxyl domain of 594 intracellular amino acids. The intracellular domain possessed a kinase-like region and a catalytic region. Nine and fifteen serine residues existed in the kinase-like and the catalytic regions, respectively. We purified three different protein phosphatases from the sperm tails. The activity of these enzyme was inhibited by calyculin A. | |||||
| 内容記述 | ||||||
| 内容記述タイプ | Other | |||||
| 内容記述 | 研究課題/領域番号:02044059, 研究期間(年度):1990 – 1992 | |||||
| 内容記述 | ||||||
| 内容記述タイプ | Other | |||||
| 内容記述 | 出典：研究課題「精子活性化ペプチドの作用機構」課題番号02044059 （KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-02044059/020440591992kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/）を加工して作成 |
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| 著者版フラグ | ||||||
| 出版タイプ | AM | |||||
| 出版タイプResource | http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa | |||||
| 関連URI | ||||||
| 識別子タイプ | URI | |||||
| 関連識別子 | https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=20082133 | |||||
| 関連名称 | https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=20082133 | |||||
| 関連URI | ||||||
| 識別子タイプ | URI | |||||
| 関連識別子 | https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-02044059/ | |||||
| 関連名称 | https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-02044059/ | |||||
| 関連URI | ||||||
| 識別子タイプ | URI | |||||
| 関連識別子 | https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-02044059/020440591992kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/ | |||||
| 関連名称 | https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-02044059/020440591992kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/ | |||||
