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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成08(1996)年度

ウニ16細胞期胚の割球特異的に発現する遺伝子の解析

https://doi.org/10.24517/00052840
https://doi.org/10.24517/00052840
d7f978e3-4b31-4033-b96f-7b161779231b
名前 / ファイル ライセンス アクション
SC-PR-YAMAGUCHI-M-kaken SC-PR-YAMAGUCHI-M-kaken 1997-13p.pdf (226.4 kB)
license.icon
Item type 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2018-11-19
タイトル
タイトル ウニ16細胞期胚の割球特異的に発現する遺伝子の解析
タイトル
タイトル Blastomere-Specific Genes of the 16-cell Sea Urchin Embryo
言語 en
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00052840
ID登録タイプ JaLC
著者 山口, 正晃

× 山口, 正晃

WEKO 2345
e-Rad 60182458

山口, 正晃

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書誌情報 平成8(1996)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書
en : 1996 Fiscal Year Final Research Report

巻 1995-1996, p. 13p., 発行日 1997-03
出版者
出版者 金沢大学理工研究域生命理工学系
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 ウニ胚の細胞運命決定の分子機構を理解するうえで,鍵となる3つの因子,小割球決定因子,小割球から出される内胚葉誘導因子,リチウムイオンが活性化する因子,を明らかにするため,2つのアプローチで実験を行なった。
一つは,ウニ16細胞期胚の割球をエルトリエータによって分離し,小割球とその系譜細胞に特異的に発現する遺伝子,あるいは中割球系譜細胞においてリチウムイオン依存的に発現する遺伝子を,差次的に検索することである。具体的には,differential screening法,differential display法,subtraction PCR法を試みた。differntial display法によって小割球とその系譜細胞特異的に発現すると思われる約120の遺伝子断片を単離した。それらの断片に対して,各割球とその系譜細胞から抽出したRNAを逆転写したcDNAをプローブとして,サザン法によって二次スクリーニングし,10遺伝子断片を得た。また,subtraction PCR法によって,小割球とその系譜細胞特異的に増幅されるcDNA断片を3種,リチウムイオン依存的に増幅されるcDNA断片1種を検出した。これらの遺伝子の胚における発現の局在性を,in situハイブリダイゼーション法によって確認する作業を進めている。
一方,鍵となる因子を,その活性を追うことによって単離するexpression cloning法も試みた。現在のところ,その活性を検出していないが,小割球から出される内胚葉誘導因子は,これまで考えられてきた胚期(16-64細胞期)よりもはるかに遅い孵化胞胚期に発現することが明らかになった。
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 To understand molecular mechanisms of cell fate determination of the sea urchin embryo, we searched for key genes that encode the micromere-determinant and the archenteron-inducing ligand released from the micromere, and that are activated by lithium ion.
We differentially screened genes whose expression is restricted in the micromeres or the descendants, and is dependent of lithium ion in the mesomere-descendent cells. By the differential display, we obtained approximately 120 DNA fragments that seemed to be the micromere and/or the descendant-specific. Then, we performed the Southern blot analysis to check the specificity. We prepared poly (A^+) RNAs from the micromere and the mesomere as well as their descendants, and used the cDNAs as probes. As the result, we obtained 10 DNA fragments that showed stronger signals to the micromere-probe. By the subtraction PCR,we also detected 1 micromere-specific, 2 micromere descendant-specific, and 1 lithium ion-dependent DNA fraqments. Now, we are under way to examine their expression in the embryo by in situ hybridization
We also tried the expression cloning to isolate the key genes. We prepared poly (A^+) RNA from the ovary, the fertilized egg, as well as the 16-cell embryo. By injecting the RNAs into one of the mesomeres of the 16-cell embryo, we examined the activity that turns the injected cell into the micromere-phenotype, and that induces the adjacent cells to form the archenteron. We however, detected no activity with any RNAs.
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:07836006, 研究期間(年度):1995-1996
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:「ウニ16細胞期胚の割球特異的に発現する遺伝子の解析」研究成果報告書 課題番号07836006
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
   本文データは著者版報告書より作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=60182458
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=60182458
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07836006/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07836006/
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-07836006/078360061996kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-07836006/078360061996kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
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