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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成15(2003)年度

ヘム蛋白プロファイリングによる細胞膜酸素センサー分子の同定

https://doi.org/10.24517/00060453
https://doi.org/10.24517/00060453
7f522dd0-abdf-4c1d-ae9f-c0c34234d8f2
名前 / ファイル ライセンス アクション
ME-PR-YAMOTO-H-kaken ME-PR-YAMOTO-H-kaken 2016-3p.pdf (204.2 kB)
license.icon
アイテムタイプ 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2021-02-19
タイトル
タイトル ヘム蛋白プロファイリングによる細胞膜酸素センサー分子の同定
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00060453
ID登録タイプ JaLC
著者 山本, 博

× 山本, 博

WEKO 52
e-Rad 00115198
研究者番号 00115198

山本, 博

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提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 金沢大学医薬保健研究域医学系
書誌情報 平成15(2003)年度 科学研究費補助金 萌芽研究 研究概要
en : 2003 Research Rroject Summary

巻 2002 – 2003, p. 3p., 発行日 2016-04-21
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 本研究の目的は、細胞膜上にヘム蛋白性酸素感受性イオンチャンネルを持つPC12細胞を用い、その細胞膜画分のヘム蛋白をプロファイリングすることにより、新規酸素感受性分子(酸素センサー)を同定することである。
平成14年度中の研究により、Lithium Dodecyl Sulfate (LDS)を用いた低温下ポリアクリルアミドゲル電気泳動法(LDS-PAGE)と、ヘム分子団のペルオキシダーゼ様活性に基づきヘム蛋白を特異的に検出するルミノール化学発光反応を組み合わせた、高感度ヘム蛋白検出法を確立した。
平成15年度の研究は当初計画通りに遂行され、以下の成果を得た。
1.PC12細胞の粗精製細胞膜画分蛋白を低温下LDS-PAGEにより分離後、ルミノール化学発光反応液中でインキュベートしフルオログラフィーをとることにより、粗精製細胞膜画分に含まれるヘム蛋白のバンドを同定した。さらに、同一試料を並行して泳動したレーンをクマジーブリリアントブルーで染色することによって得られた全蛋白の染色バンドと、フルオログラム上のヘム蛋白のバンドの位置を比較することにより、ヘム蛋白を含むと推定される蛋白のバンドを同定した。
2.1.によって同定された蛋白のバンドを切り出し、そこに含まれる蛋白を、液体クロマトグラフィー・マススペクトロメトリー法によって同定した。その結果、約50種の蛋白が同定された。
3.現在、2.によって同定された蛋白の中から、構造や推定される機能などに基づいてヘム蛋白である可能性の高いものを抽出し、ヘムとの結合性を検討中である。すでに、ソーレーバンド(蛋白とヘムとの結合により見られる波長400nm付近の特異的吸収帯)などにより、ヘムとの安定した結合が確認されている蛋白もある。今後、これらの新規ヘム蛋白の機能の解析を進めていく予定である。
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:14657032, 研究期間(年度):2002 – 2003
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:「ヘム蛋白プロファイリングによる細胞膜酸素センサー分子の同定」研究成果報告書 課題番号14657032
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-14657032/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=00115198
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=00115198
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-14657032/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-14657032/
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Ver.1 2023-07-27 14:37:12.432186
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