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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成05(1993)年度

インターロイキン1受容体の細胞内領域と会合するタンパク質因子の解析

https://doi.org/10.24517/00066611
https://doi.org/10.24517/00066611
13c09ac8-b7d0-4074-9f8d-18193774f91b
名前 / ファイル ライセンス アクション
CA-PR-KUNO-K-kaken CA-PR-KUNO-K-kaken 2016-2p.pdf (157.9 kB)
license.icon
Item type 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2022-07-04
タイトル
タイトル インターロイキン1受容体の細胞内領域と会合するタンパク質因子の解析
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00066611
ID登録タイプ JaLC
著者 久野, 耕嗣

× 久野, 耕嗣

WEKO 88086
e-Rad 40242565

久野, 耕嗣

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提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 金沢大学がん研究所
書誌情報 平成5(1993)年度 科学研究費補助金 奨励研究(A) 研究概要
en : 1993 Research Project Summary

巻 1993, p. 2p., 発行日 2016-04-21
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 1) 本研究は、IL-1R/GSTの融合タンパク質を用い、IL-1Rの細胞内領域と特異的に結合するタンパク因子を同定、精製することを目的としている。ます、マウス、タイプI-IL-1RのcDNAをテンプレートとしてPCR法によりIL-1Rの細胞内領域部分のDNAフラグメントを増幅し、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ(GST)融合タンパク発現ベクターpGENT2に組み込み、pCL1R/GSTプラスミドを得た。次にこのプラスミドを用い、大腸菌JM109株でIPTG刺激によりIL-1R/GST融合タンパク質の発現を行ったところ、期待された50kDaのIL-1R/GST融合タンパク質の大量発現がSDS-PAGE上で観察された。しかし発現されたIL-1R/GST融合タンパク質は、そのほとんどが不溶性分画に存在するため精製が難しく、現在のところSDS-PAGE上単一バンドになるまで精製されていない。現在、グアニジン法による可溶化とHPLC等によるIL-1R/GST融合タンパク質の精製を試みている。また、GST以外の他の融合タンパク発現系を現在検討中である。
2) 上記の実験と平行して、IL-1,TNFによるシグナル伝達経路,特にIL-8産生誘導に関与するプロテインキナーゼを検索する基礎的知見を得るため、各種プテインキナーゼ阻害剤の作用を調べた。その結果、胃癌細胞株MKN45細胞でのIL-1,TNFによるIL-8産生誘導および、IL-8遺伝子プロモーターの活性化は、プロテインキナーゼ阻害剤H7により濃度依存的に抑制されるが、HA1004やスタウロスポリンではIL-1,TNFの作用は抑制されないことがわかった。これらの結果から、IL-8遺伝子発現誘導におけるIL-1,TNFによるシグナル伝達にPKCとは異なるH7感受性キナーゼが関与することが示唆された。またIL-1,TNFによるIL-8産生はチロシンキナーゼ阻害剤であるハービマイシンAにより阻害されることから、IL-1,TNFによるIL-8産生誘導のいずれかのステップにチロシンキナーゼが関与していることが示唆された。
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:05770228, 研究期間(年度):1993
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:研究課題「インターロイキン1受容体の細胞内領域と会合するタンパク質因子の解析」課題番号05770228
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-05770228/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=40242565
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=40242565
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-05770228/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-05770228/
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Ver.1 2023-07-27 12:41:02.430372
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