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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成22(2010)年度

トランスポートフォトコンバーター:多様な薬の生体膜透過を光に変換する新規計測技術

https://doi.org/10.24517/00066798
https://doi.org/10.24517/00066798
378b6275-9d7d-4934-b59b-c45a4ace50d6
名前 / ファイル ライセンス アクション
PH-PR-KATO-Y-kaken PH-PR-KATO-Y-kaken 2016-2p.pdf (155.5 kB)
license.icon
Item type 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2022-07-21
タイトル
タイトル トランスポートフォトコンバーター:多様な薬の生体膜透過を光に変換する新規計測技術
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00066798
ID登録タイプ JaLC
著者 加藤, 将夫

× 加藤, 将夫

WEKO 29
e-Rad 30251440
金沢大学研究者情報 30251440
研究者番号 30251440

加藤, 将夫

Search repository
提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 金沢大学薬学系
書誌情報 平成22(2010)年度 科学研究費補助金 挑戦的萌芽研究 研究課題概要
en : 2010 Research Project Sumary

巻 2009 – 2010, p. 2p., 発行日 2016-04-21
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 ATPを駆動力とする排出トランスポーター(ABCトランスポーター)P糖タンパク質(P-gp)の輸送機能の可視化を確立するため、本年度は内因性P-gp発現細胞の使用と細胞膜透過性Ca indicatorの導入を検討した。神経芽腫細胞株Neuro2Aを用い特異的プライマーを用いた定量PCRを行ったところ、内因性P-gpの発現が認められた。これまでの検討で用いていたミトコンドリアCa検出プローブであるpericam-mtでは、リン酸カルシウム法やリポフェクション法のような侵襲的方法による細胞への遺伝子導入を必要とするため、そのような導入を伴わないCa検出法として、細胞膜透過性Ca indicatorであるfluo-3 AMを併せて検討した。Fluo-3 AMをNeuro2Aに負荷し、細胞を洗浄後静置して細胞内Ca濃度を平衡化した後、A23187(calcium ionophore)を曝露したが、蛍光変化はほとんど観察されなかった。原因としてABCトランスポーターによるfluo-3の排出が考えられたため、ABCトランスポーター阻害剤であるprobenecidを添加したところ、定常状態の蛍光強度が大幅に改善した。この条件でA23187を曝露したところ著明な蛍光強度上昇を認め、Ca検出が可能となった。さらにこの系を用い、P-gpの基質であるverapamilを添加したところ、蛍光強度の増大が認められた。以上より、本実験系でP-gpによる薬物輸送をCaシグナルに変換し蛍光検出できる可能性が示された。前年度に確立したpericam-mtと併せ、可視化を実現する複数の実験系を確立することができた。現在、蛍光強度比の増大は評価対象とする細胞に大きく依存している。増大の観察される細胞と、されない細胞が共存するため、より定量的な解析を行うためにはさらなる実験系の改良が必要である。
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:21659006, 研究期間(年度):2009 – 2010
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:研究課題「トランスポートフォトコンバーター:多様な薬の生体膜透過を光に変換する新規計測技術」課題番号21659006
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-21659006/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=30251440
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=30251440
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-21659006/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-21659006/
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Ver.1 2023-07-27 12:38:06.333200
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