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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成02(1990)年度

非A非B肝炎型ウイルスゲノムのクローニング

https://doi.org/10.24517/00067354
https://doi.org/10.24517/00067354
02a4e846-9b8b-4fae-9447-71d9f9c94793
名前 / ファイル ライセンス アクション
CA-PR-MURAKAMI-S-kaken CA-PR-MURAKAMI-S-kaken 2016-2p.pdf (140.9 kB)
license.icon
Item type 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2022-11-17
タイトル
タイトル 非A非B肝炎型ウイルスゲノムのクローニング
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00067354
ID登録タイプ JaLC
著者 村上, 清史

× 村上, 清史

WEKO 71908
e-Rad 90019878

村上, 清史

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提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 金沢大学がん研究所
書誌情報 平成2(1990)年度 科学研究費補助金 一般研究(C) 研究課題概要
en : 1990 Research Project Summary

巻 1990, p. 2p., 発行日 2016-04-21
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 血清中のカイロン社のHCV抗体価の高値を与えたHCV肝炎肝癌患者で肝部分切除により試料を得た3例を出発材料としてRNAを抽出精製した。これらの試料でOligoーdT及びランダムプラマ-によるcDNAクロ-ニングを試みたが成功せず,PCR法による部分クロ-ニングを行った。RNAを鋳型とした1次プライマ-によるRーPCRの後、2次プライマ-によるPCRを行なう、RーPCR,double PCR法を行なった。プライマ-はカイロン社の報告に基づく10セット以上のプライマ-を用いたがPositiveな結果は2セットのみであった.PCRで強いバンドを得た配列をプライマ-として、再びcDNAクロ-ニングを試みたが長いcDNAを得ることは成功しなかった。
最も強いPCRバンドを与えた試料を用いて既知のHCV配列に基づくプライマ-によるPCRクロ-ニングを繰り返し、HCVサブゲノムのクロ-ニングを行った。同一試料による独立した3個のクロ-ンを単離し、それらの塩基配列を決定する方法でPCRによる変異の影響を排除した。現在3'端の一部を除き全てクロ-ンを得て、その配列を決定した。
その結果、1)非構造遺伝子領域の多くの患者試料の塩基配列決定の結果は、カイロン社の報告と約20%以上変異のあるグル-プが日本では高率に検出され、これらのクロ-ン間の変異率は5%以下で近接していた。従って日本ではカイロン社の型(アメリカ型)とは異なるサブグル-プの存在が示唆された(Kaneko et al.,Lancet,1990及びKaneko et al.,in printing,1991)。2)構造遺伝子領域及び5'非遺伝子領域は非構造遺伝子領域に比べ変異率は低く特にEnvの領域でVariable region以外は配列の保存性は高い(Honda et al,in preparation)。今後サブゲノムの接続によって全ゲノムサイズのクロ-ンの作成と各遺伝子部分の癒合遺伝子産物の大腸菌での発現と精製を基にこれらの部分に対する抗体の作成を計画している。
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:02808048, 研究期間(年度):1990
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:研究課題「非A非B肝炎型ウイルスゲノムのクローニング」課題番号02808048
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-02808048/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=90019878
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=90019878
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-02808048/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-02808048/
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Ver.1 2023-07-27 11:37:27.843848
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