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  1. N. 科研費研究成果報告書, JSTプロジェクト報告書, COE報告書
  2. n-1. 科学研究費成果報告書
  3. 平成15(2003)年度

転写促進異常症候群の分子病態解明

https://doi.org/10.24517/00061162
https://doi.org/10.24517/00061162
2777745e-3952-4782-8443-43433d0b7116
名前 / ファイル ライセンス アクション
PH-PR-ISHIGAKI-Y-kaken PH-PR-ISHIGAKI-Y-kaken 2016-2p.pdf (166.3 kB)
license.icon
Item type 報告書 / Research Paper(1)
公開日 2021-05-21
タイトル
タイトル 転写促進異常症候群の分子病態解明
言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
ID登録
ID登録 10.24517/00061162
ID登録タイプ JaLC
著者 石垣, 靖人

× 石垣, 靖人

WEKO 95708
e-Rad 20232275

石垣, 靖人

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提供者所属
内容記述タイプ Other
内容記述 金沢大学理工研究域
書誌情報 平成15(2003)年度 科学研究費補助金 若手研究(B) 研究概要
en : 2003 Research Rroject Summary

巻 2002 – 2003, p. 2p., 発行日 2016-04-21
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 生物は紫外線、放射線、化学物質などの外的要因、および生体内で生じる代謝産物などによるDNAへの損傷から生体を守り遺伝情報を正確に次世代へ伝えるために、生じたDNA損傷を取り除くDNA修復系を進化の過程で獲得してきた。常染色体劣性遺伝疾患のコケイン症候群患者由来細胞は、特に転写と共役したDNA修復機構に異常が認められるのに加えて、通常およびストレス時の転写機構に異常がみられる。本研究ではコケイン症候群原因遺伝子の機能解析を目的として、各種遺伝子発現量の検索、蛋白質の発現解析を行った。その結果、定量的RT-PCR法によりHeLa細胞との比較においてコケイン症候群細胞の各遺伝子発現量に相違が認められ、特定遺伝子のmRNA量の減少が確認された。コケイン症候群細胞の原因遺伝子にはナンセンス変異が存在するため、その変異mRNAは選択的に分解されて消失していた。この選択的変異mRNA分解機構をシクロヘキシミド添加によって抑制したところ、コケイン症候群細胞の原因遺伝子mRNA量は回復が観察されたが、愚者細胞で発現低下が確認された遺伝子の回復は認められなかった。また、Western blottingにより蛋白質量を測定した結果、コケイン症候群細胞においてmRNAが消失していることが確認された遺伝子の蛋白質量は、コントロールのHeLa細胞と比較して有意に減少していた。この発現消失は細胞の種類によって度合いが異なるため、今後更に機構の解明を行っていくとともに発症との関連を検討していきたい。さらに、発現遺伝子のノックアウト法の構築を目指してDNA損傷修復関連遺伝子のRNAi誘導ベクターによるノックアウト系の構築を目指した。U6プロモーター下流にショートヘアピン型2本鎖RNAを発現できる配列を挿入し、培養細胞へ導入したところ標的mRNA量の特異的な減少が観察された。さらに誘導コンストラクトの改良やアデノウイルスによるRNAi誘導配列の導入法を取り入れて実験系を改善して行く予定である。
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 研究課題/領域番号:14771275, 研究期間(年度):2002-2003
内容記述
内容記述タイプ Other
内容記述 出典:「転写促進異常症候群の分子病態解明」研究成果報告書 課題番号14771275
(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))
(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-14771275/)を加工して作成
著者版フラグ
出版タイプ AM
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=20232275
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=20232275
関連URI
識別子タイプ URI
関連識別子 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-14771275/
関連名称 https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-14771275/
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Ver.1 2023-07-27 14:38:04.333197
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